サル痘ウイルス感染の検出に関する検査ガイドライン

世界保健機関（WHO）事務局長は、昨年2022年7月23日、世界規模で拡大するサル痘の流行を国際的に懸念される公衆衛生上の緊急事態（PHEIC）と宣言した。WHOによると、92の国と地域で3万5,000人以上の感染者が発生しており、12の国と地域では感染者が発生しているという。死亡者数は8月17日現在。報告された症例（渡航歴あり）のほとんどはヨーロッパと北米の地域への旅行であった。

サル痘は、天然痘を引き起こす同じウイルス科に属するエンベロープ二本鎖 DNA ウイルスであるサル痘ウイルス (MPXV) の感染によって引き起こされる稀な病気です。このウイルスは、体液、皮膚の病変、または発熱、頭痛、筋肉痛などの症状を伴う内部粘膜表面との接触を介して感染する可能性があります。サル痘の潜伏期間は通常6～13日ですが、5～21日（約3週間）の場合もあります。
WHO によると、最良の診断用検体は発疹から直接採取される皮膚、体液、かさぶた、あるいは生検（可能な場合は生検）であるとのことです。抗原や抗体の検出などの他の方法は、オルトポックスウイルスを区別できないため、役に立たない可能性があります。

研究室でサル痘の疑い例、疑い例、または確定例の検体を操作する場合には、リスクベースのアプローチが推奨されます。したがって、リスクグループ 3 の病原体として分類される MPXV の存在を検出する手順は、以下に示す機器のリストを使用してバイオセーフティ レベル 2 の実験室で実行する必要があります。

サル痘ウイルス検出用機器ガイド

検体と試薬の保管

MPXV 標本は 2°C ～ 8°C で冷蔵保存することが推奨されていますが、収集後 1 時間以内に冷凍 (-20°C 以下) する必要があります。輸送時間が 7 日を超える場合、検体は -20°C 以下で保管する必要があります。一方、検体の長期保管（採取から 60 日以上）には -70°C が推奨されます。

Biobase 研究所用冷蔵庫、研究所用冷凍庫、超低温冷凍庫には、重要な保管条件を必要とする温度に敏感な生体サンプルの保管に適した、適切に設計された冷凍システムと高品質の素材が装備されています。

サンプルの取り扱いと準備

MPXV は、汚染物質や不適切な方法により、検体処理段階で感染する可能性があります。その結果、バイオセーフティ対策の強化が観察されることになります。サンプルを不活化する前に、MPXV が疑われる患者からの検体を機能的なクラス II バイオセーフティキャビネットで準備する必要があります。ただし、これは適切に不活化された検体には必要ありません。

バイオセーフティ キャビネットが提供する保護とは別に、Biobase クラス II バイオセーフティ キャビネットはユーザーフレンドリーな機能を備えた NSF 49 および EN 12469 に準拠しており、安全性を向上させるためにすべての外側および内側の塗装面に抗菌パウダーでコーティングされています。遠心分離機は、標本の液体成分と固体成分を分離するために必要です。手順に必要な場合は、安全カップまたは密閉ローターの使用をお勧めします。

検出と分析

MPXV 感染を確認するために、核酸増幅検査 (NAAT) が行われます。固有のウイルス DNA 配列を検出するには、リアルタイム PCR または従来のポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) が使用されます。ウイルスの検出には 2 つのステップが含まれます。最初の PCR ではオルソポックス ウイルスが検出されますが、種は特定されませんが、2 番目の PCR (またはシーケンス) では MPXV が特異的に検出されます。

リアルタイム PCR サーマル サイクラーは、ウイルス分析用の核酸を効率的に増幅します。Biobase は、PCR プログラムの入力、モニタリング、分析をスタンドアロンで実行できる内蔵コンピューターを備えた新しい Swift™ PCR サーマル サイクラーを提供します。